Mycoplasma

author
2 minutes, 20 seconds Read

Mycoplasma “colony” på en speciel formel agar plade @ 100 gange forstørrelse.

Mycoplama vokser ikke som kolonier i cellekulturer og kan ikke påvises ved lysmikroskopi.

 et foto af en mycoplasma-koloni, der bruges til at illustrere forurening i cellekultur.

beskrivelse: mycoplasmer (PPLO) er små (0,2 – 0,3 mikron) vægløse bakterier, der kan vokse til meget høje koncentrationer i pattedyrs cellekulturer, typisk 107-108 organismer/ml, mens de ikke kan observeres ved regelmæssig lysmikroskopi. Selvom mycoplasma-kontaminering i sent stadium kan forårsage, at cellekulturmedium bliver surt, er der normalt ingen åbenlyse tegn på, at kulturer er kontamineret andet end beskrevet nedenfor.

egenskaber i pattedyrscellekulturer: i tidlige stadier af kontaminering forårsager mycoplasmer typisk ikke pH-ændringer i mediet, og de har heller ikke signifikante toksiske virkninger på pattedyrceller. Mycoplasmer vokser for det meste forbundet med pattedyrs cellemembraner. I mange tilfælde er der ingen tegn på mycoplasma-kontaminering, men mycoplasma kan forårsage ændringer i cellevækstkarakteristika, hæmning af cellemetabolisme, forstyrrelse af nukleinsyresyntese, kromosomale abberationer, ændringer i cellemembranantigenicitet og kan ændre transfektionshastigheder og virusmodtagelighed. Den eneste måde at bekræfte mycoplasma-forurening er ved rutinemæssig test ved hjælp af specielle teknikker. Arten af de tilgængelige tests får TCF til at anbefale at bruge to typer test til et bekræftende resultat, mens kun brug af en type test skal betragtes som et formodet resultat.

typiske infektionsveje i kulturer: i de fleste tilfælde forekommer mycoplasma-kontaminering gennem krydskontaminering fra uprøvede inficerede celler til andre cellelinjer. Ruten sker typisk via luftbåren mikroskopisk aerosolisering under pipettering eller anden overførsel af medium og/eller celler under rutinemæssig håndtering, når mere end en cellelinie er under hætten ad gangen, eller når den samme flaske medium bruges til mere end en cellelinie. Den bedste forebyggelse er god aseptisk teknik i forbindelse med rutinemæssig test. Forsøg altid at arbejde “rent til snavset” i rækkefølge efter håndtering af kulturer i løbet af en arbejdsdag eller uge. Det vil sige, håndtere bekræftede ukontaminerede celler først, ukendte eller uprøvede celler næste, og endelig celler, der mistænkes eller vides at være forurenet, men skal opbevares i laboratoriet af særlige grunde.

antibiotika: de fleste rutinemæssige antibiotika, der anvendes i cellekultur, er ikke effektive mod mycoplasma. Gentamicinsulfat, kanamycinsulfat og tylosintartrat er noget effektive, men kan kun være hæmmende snarere end mycoplasmacidal. Et behandlingsprodukt fra Roche Molecular Biochemicals, B-M Cyclin og antibiotika er to af de mest effektive behandlinger til at forsøge at helbrede mycoplasma infektioner, men har generelt succesrater under 80% til 85%. En meget nyttig liste over antibiotika, de organismer, de er effektive mod, og anbefalede arbejdskoncentrationer udarbejdet af Sigma-Aldrich-firmaet kan findes som et pdf-dokument (129 KB, 3 sider) ved at klikke på følgende link. Filen vil blive hentet og kan åbnes med Adobe Acrobat Reader. Antibiotikaliste

Similar Posts

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.