Mycoplasma

author
2 minutes, 11 seconds Read

Mycoplasma» koloni » på en spesiell formel agar plate @ 100x forstørrelse.

Mycoplama vokser ikke som kolonier i cellekulturer og kan ikke påvises ved lysmikroskopi.

 et bilde av en mykoplasmakoloni som brukes til å illustrere forurensning i cellekultur.

Beskrivelse: Mycoplasma (PPLO) er små (0,2 – 0,3 mikron) vegg-mindre bakterier som kan vokse til svært høye konsentrasjoner i pattedyr cellekulturer, typisk 107 – 108 organismer / ml, mens resterende unobservable ved vanlig lysmikroskopi. Selv om sent stadium mycoplasma forurensning kan føre til cellekultur medium til å bli surt, vanligvis er det ingen åpenbare tegn på at kulturer er forurenset annet enn beskrevet nedenfor.

Egenskaper i pattedyrcellekulturer: i tidlige stadier av forurensning forårsaker mykoplasmer vanligvis ikke pH-endringer i mediet, og de har heller ikke signifikante toksiske effekter på pattedyrceller. Mykoplasmer vokser for det meste forbundet med pattedyrcellemembraner. I mange tilfeller er det ingen tegn på mykoplasmaforurensning, men mykoplasma kan forårsake endringer i cellevekstegenskaper, inhibering av cellemetabolisme, forstyrrelse av nukleinsyresyntese, kromosomale abberasjoner, endringer i cellemembranantigenicitet, og kan endre transfeksjonshastigheter og virusutsatthet. Den eneste måten å bekrefte mycoplasma forurensning er ved rutinemessig testing ved hjelp av spesielle teknikker. Arten av de tilgjengelige testene fører TCF til å anbefale å bruke to typer tester for et bekreftende resultat, mens bruk av bare en type test bør betraktes som et presumptivt resultat.

Typiske infeksjonsveier i kulturer: i de fleste tilfeller oppstår mykoplasmaforurensning gjennom krysskontaminering fra uprøvde infiserte celler til andre cellelinjer. Ruten er vanligvis via luftbåren mikroskopisk aerosolisering under pipettering eller annen overføring av medium og / eller celler under rutinemessig håndtering når mer enn en cellelinje er under hetten om gangen eller når samme flaske medium brukes til mer enn en cellelinje. Den beste forebyggingen er god aseptisk teknikk i forbindelse med rutinemessig testing. Prøv alltid å jobbe «clean-to-dirty» for å håndtere kulturer i løpet av en arbeidsdag eller uke. Det vil si, håndtere bekreftede ukontaminerte celler først, ukjente eller uprøvde celler neste, og til slutt celler som er mistenkt eller kjent for å være forurenset, men må beholdes i laboratoriet av spesielle grunner.

Antibiotika: de fleste rutinemessige antibiotika som brukes i cellekultur er ikke effektive mot mykoplasma. Gentamicinsulfat, kanamycinsulfat og tylosintartrat er noe effektive, men kan bare være hemmende i stedet for mykoplasmacidal. Et behandlingsprodukt Fra Roche Molekylære Biokjemikalier, B – M Cyclin og antibiotikumet ciprofloxacin er to av de mest effektive behandlingene for å forsøke å kurere mykoplasmainfeksjoner, men har generelt suksessrate under 80% til 85%. En veldig nyttig liste over antibiotika, organismene de er effektive mot, og anbefalte arbeidskonsentrasjoner utarbeidet Av Sigma-Aldrich-Selskapet, finnes som et pdf-dokument (129kb, 3 sider) ved å klikke på følgende link. Filen lastes ned og kan åpnes Med Adobe Acrobat Reader. Antibiotisk Liste

Similar Posts

Legg igjen en kommentar

Din e-postadresse vil ikke bli publisert.