Quantificação de espectrometria de massa

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este tutorial se aplica à quantificação de pequenas moléculas usando espectrometria de massa em análise farmacocinética. Além disso, esses mesmos princípios podem ser aplicados à quantificação de peptídeos e proteínas em matrizes biológicas.

tradicionalmente antes do advento da quantificação da espectrometria de massa moderna foi realizada usando HPLC e detecção UV. A análise PK da HPLC contou com: tempo de retenção, área de pico e caráter espectral UV. Infelizmente, o ensaio HPLC sofria de falta de sensibilidade e especificidade. Vimos exemplos em que uma molécula foi extensivamente metabolizada e, no entanto, o tempo de retenção e o caráter espectral UV permaneceram os mesmos que o composto pai. Essa falta de especificidade de vez em quando enganará o investigador. A caracterização da EM é agora uma ferramenta nova vital na análise farmacocinética.

a maneira Aceita de realizar a quantificação de especificação de massa é usando um espectrômetro de massa capaz de fragmentação MS/MS. MS / MS usado conjuntamente com a quantificação é conseguido geralmente com um Quadrupole triplo ou um espectrómetro maciço da armadilha do íon. A razão pela qual MS / MS é necessária é porque muitos compostos têm a mesma massa intacta. Enquanto muitos pesquisadores usam a primeira dimensão da em para realizar a quantificação, essa técnica novamente sofre de falta de especificidade, especialmente em matrizes muito complexas como o sangue. A segunda dimensão da fragmentação da em na maioria dos casos fornece um fragmento único. A combinação da massa original específica e do íon original do fragmento é usada para monitorar seletivamente para que o composto seja quantificado. Abaixo, discutiremos o método para adquirir e visualizar dados LC/MS.

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